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These premises were taken into consideration in our experimental design, where the image color deconvolution was applied ( Figure 5 ). Previous methods have tried to overcome this color-related issue by subtraction of color intensity of the nucleus with that of the background [21]. The problem with this technique is that the difference between the dark blue and light brown nuclei cannot be made; this is avoided in our study by separating signals of DAB-staining from those originating from hematoxylin (deconvolution). This deconvolution algorithm has been previously suggested by Ruifrok and Johnston for the same purposes as presented here [34]. One of the major features of this study is that the analysis is based on simple, cheap, and available software: ImageJ. Finally, it represents a great benefit for patients with BC, since receptor expression analysis is crucial for the determination of the prognostic indexes [25]. Although no generally accepted standards for morphometric and photometric analysis are available [37], one can say that the results of this study can be useful for comparison between different histological variants of BC. The Allred scoring system is based on the semi-quantitative estimation of percentage abundance of positive cancer cell nuclei and staining intensity, where the expression limit is 10% of weakly or 1% of medium-stained cancer cell nuclei [18]. However, different previous studies have estimated a cutoff value between positive and negative immunohistochemical staining [38,39]. A esportiva snooker.Established: Introduction.
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